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Publiez vos documents !Molécules antioxydantes d'une descendance de cichorium intybus : identification et mise en évidence d'une variabilité due au génotype
Résumé de l'exposé
Une analyse qualitative et quantitative des molécules antioxydantes d'une descendance issue d'un croisement entre 2 souches de cichorium intybus, K28 et K59, a été réalisée. Les feuilles de différents plants ont été prélevées et une extraction de composés phénoliques ainsi qu'une élimination de la chlorophylle a été effectuée. Des chromatographies sur couche mince et des chromatographies liquides à haute performance, réalisées dans différentes conditions, ont permises d'identifier un certain nombre de molécules antioxydantes présentent dans les échantillons et de déterminer une concentration pour certaines d'entre elles. Pour chacun des échantillons, une mesure de la concentration en phénols totaux par la méthode de dosage de Folin-Ciocalteu, ainsi qu'une mesure de l'activité anti-radicalaire par le test DPPH ont été réalisées. Pour chacune des mesures quantitatives effectuées, un test statistique a permis de déterminer l'origine des différences observées entre les plantes. Nous avons reporté la présence d'acide chlorogénique et d'acide caféique dans tous les échantillons et celle d'acide chicorique dans certains d'entre eux. Des disparités dues aux différences génotypiques ont été constatées pour : l'activité antiradicalaire, la quantité de phénols totaux, d'acide chlorogénique, d'acide caféique ainsi que celle de trois composés non identifiés.
Sommaire de l'exposé
- Matériel et méthodes
- Description du matériel végétal utilisé
- Préparation des solutions
- Préparation du matériel végétal
- Macération du broyat
- Prélèvement du surnageant
- Préparation de 45ml de la solution de Folin 1/14éme (solution F)
- Préparation des échantillons
- Préparation de la gamme étalon
- Dosage
- Préparation des échantillons
- Traitement informatique des données
- Dosage (Folin-Ciocalteu)
- Analyse statistique
- Test DPPH
- Corrélation entre concentration en phénols totaux et activité antiradicalaire
Extraits de l'exposé
[...] Il aurait été préférable que chacun des binômes dispose pour ses mesures, des 3 clones d'un même génotype. Ainsi, les variations dues à l'environnement auraient pues être séparées des variations dues à l'expérimentateur. Ainsi chaque variation aurait pu être quantifié précisément. Malheureusement, le temps dont nous disposions pour l'expérience ne nous permettait pas un si grand nombre de mesures. Les profils chromatographiques obtenus par CCM et par HPLC nous ont révélés la présence dans les extraits de molécules que nous n'avons pas pu identifier. [...]
[...] Les DO de chacun des échantillons ont été converties en mg/mL puis transformées en mg/g de Matière fraîche. Mesure de l'activité pure par la méthode du DPPH : Préparation de 50mL de la solution 100µM de DPPH à partir d'une solution 500µM : La solution a été diluée 5 fois et nommée solution D. Préparation des échantillons 3µL de chaque échantillon (E37 à E48) ont été prélevés et complétés à 25µL avec du méthanol. Tous les tubes ont été vortéxés. [...]
[...] Toutes les valeurs de concentration en mg/mL ont donc pues être converties en mg/g de matière fraiche. Calculs statistiques Le logiciel nous à permis de calculer le CMg, le CMe à l'aide des formules suivantes : Cmg=n(i(Pi.-P . Cme=(i(j(Pij-Pi.)2/g(n-1) Avec, pour chaque composé dont on fait l'analyse statistique : nombre de génotypes nombre de répétitions Pi.= moyenne de tous les échantillons pour 1 génotype P . = moyenne de tous les échantillons Pij= concentration pour un échantillon Pi.=moyenne des concentrations pour un génotype Résultats Chromatographie sur couche mince T1 T 2 T 3 E12 E25 E37 E49 E61 E72 Figure 2 : Chromatographie sur couche mince, révélée par pulvérisation de DPPH. [...]
[...] L'hypothèse d'une variabilité due aux différences génotypiques s'applique donc aussi pour l'activité antiradicalaire. L'activité antiradicalaire moyenne varie selon les génotypes étudiés de 4,33 à 0,89 equivalents trolox/g de matière fraiche, avec différents intermédiaires entre ces valeurs (fig11). Analyse statistique des résultats obtenus par HPLC : Test F : Pour chaque pic, des valeurs de concentration exprimées en mg/mL ont été déterminées par le logiciel d'analyse. Comme indiqué au chapitre Matériels et méthodes, ces valeurs ont été converties en mg/g de matière fraiche. [...]
[...] Molécules antioxydantes d'une descendance de Cichorium intybus : identification et mise en évidence d'une variabilité due au génotype Résumé Une analyse qualitative et quantitative des molécules antioxydantes d'une descendance issue d'un croisement entre 2 souches de Cichorium intybus, K28 et K59, a été réalisée. Les feuilles de différents plants ont été prélevées et une extraction de composés phénoliques ainsi qu'une élimination de la chlorophylle a été effectuée. Des chromatographies sur couche mince et des chromatographies liquides à haute performance, réalisées dans différentes conditions, ont permises d'identifier un certain nombre de molécules antioxydantes présentent dans les échantillons et de déterminer une concentration pour certaines d'entre elles. [...]
Descriptif de l'exposé
- Date de publication
- 2007-03-08
- Date de mise à jour
- 2007-03-08
- Langue
- français
- Format
- Word
- Type
- dissertation
- Nombre de pages
- 11 pages
- Niveau
- avancé
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- le comité de lecture
