Travaux pratiques de biotechnologie : les cellules de Malassez

Extraits de l'étude de cas

[...] Résultats Les comptages correspondent à une moyenne des comptages sur 4 cellules de Malassez. Tableau de comptage sur 4 carrés de cellules de Malassez de la lignée C6 de Margot Figure 1 Tableau de comptage sur 4 carrés de cellules de Malassez de la lignée MiH3P3 de Margo?t Figure 2 Tableau de comptage sur 4 carrés de cellules de Malassez de la lignée C6 d'Alex Figure 3 Tableau de comptage sur 4 carrés de cellules de Malassez de la lignée MiH3P3 d'Alex Figure 4 Tableau d'affichage de N1= nombre de cellules en fin de culture Figure 5 Tableau des du nombre de cellules moyennes de chaque lignée et de leur temps de doublement Figure 6 Exemple pour le temps de doublement de C6 : - Mise en culture de 200?000 cellules le 18 mars 2019 à 12h30 - Ajout de la trypsine le 20 mars à 10h30 - Temps total de mise en culture : 46 h - La formule est : log2)/(log N1-log N0) log2)/(log 521875 - log 200000) =33,24 donc 33 h et 14 minutes - Pour la lignée C6, il faudra donc 33 heures et 14 minutes à la cellule mère pour se diviser en 2 cellules filles D. [...]

[...] Dans chaque boite se trouve un nombre égal de cellules ensemencé Figure 7 : Tableau récapitulatif des résultats du comptage des cellules de Malassez D. Discussion La courbe se décompose en 2 phases, premièrement la phase exponentielle correspondant à la prolifération intensive des cellules, sur la courbe cette phase se manifeste au niveau des 2 premiers pourcentages de sérum ajouté. La seconde phase visible correspond à la phase stationnaire correspondant à un ralentissement de la prolifération cellulaire visible à partir des 2 et de sérum jusqu'à cette phase est longue et stabilise la prolifération cellulaire. [...]

[...] La principale caractéristique du SVF est de maintenir les cellules en culture dans un milieu dans lequel elles peuvent survivre, grandir et se multiplier. B. Matériel et méthode L'unique chose qui diffère de la séance 1 est dorénavant la présence de 6 boîtes par groupe de TP à la place de 2 par personne. Chaque boîte contient un pourcentage de sérum différent. C. Résultats Le nombre total de cellules correspond aux comptages pour un carré d'une cellule de Malassez multiplié par 10?000 pour avoir le comptage dans 100 ul. [...]

[...] Matériels et méthodes Chaque boîte à étudier contient des cellules et un milieu de culture. Les cellules sont adhérentes, celles-ci sont observées au microscope pour vérifier qu'elles ne sont pas confluentes à 100%, car s'il y a inhibition de contact il n'y a pas de doublement. Une fois vérifiés, viens l'étape de l'aspiration du milieu, premièrement un rinçage avec 1 ml de PBS qui a pour but d'enlever complètement le sérum (qui est dans le milieu de culture). Le sérum contient l'inhibiteur de la trypsine. [...]